ACK紅細胞裂解液主要由氯化銨(NH4Cl)、碳酸氫鉀(KHCO3)和磷酸二氫鈉(NaH2PO4)等成分組成。其工作原理是通過低滲溶液破壞紅細胞膜的結構,使細胞內的水分迅速進入細胞內,導致細胞膨脹并最終破裂。同時,氯化銨能夠改變細胞膜的通透性,加速紅細胞的溶解過程。
ACK紅細胞裂解液的特點:
1.高(gao)效(xiao)快速(su):能(neng)夠在(zai)短時間內有(you)效(xiao)地裂解(jie)紅細胞,通常(chang)在(zai)幾分鐘內即可完(wan)成。
2.溫和穩定:對(dui)其他細胞(bao)類型(xing)的影響較小,不會對(dui)白細胞(bao)造成(cheng)明(ming)顯的損傷。
3.操作簡(jian)便:使用紅(hong)細胞裂解液進行紅(hong)細胞裂解操作簡(jian)單,無需復雜的設備和步(bu)驟(zou)。
4.成(cheng)本(ben)低廉(lian):價格(ge)相對較低,適合大規(gui)模實驗和生產應用。
使用方(fang)法(fa):
1.采集血液樣(yang)本:從患(huan)者(zhe)或志(zhi)愿者(zhe)處(chu)采集適量的血液樣(yang)本,通常使(shi)用抗(kang)凝(ning)劑防(fang)止血液凝(ning)固。
2.離心(xin)分離:將血液樣本進行離心(xin)分離,得到紅(hong)細(xi)胞沉淀(dian)和(he)血漿上清液。
3.加(jia)入紅(hong)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液:向紅(hong)細(xi)胞沉(chen)淀中加(jia)入適量(liang)的紅(hong)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液,輕輕混勻。
4.孵(fu)(fu)育:將混(hun)合液置于室(shi)溫下孵(fu)(fu)育一定時間,通常(chang)為(wei)幾(ji)分鐘至(zhi)十幾(ji)分鐘不等。
5.離(li)心洗滌(di):再(zai)次進行離(li)心分離(li),棄去上(shang)清液(ye),用PBS或其他緩(huan)沖液(ye)洗滌(di)沉淀物。
6.收集細(xi)胞:將洗(xi)滌(di)后的沉(chen)淀物(wu)重懸(xuan)(xuan)于(yu)適當的培養基中,即可得到(dao)去除紅細(xi)胞的細(xi)胞懸(xuan)(xuan)液(ye)。
ACK紅細胞裂解液的優(you)勢(shi):
1.提高實(shi)驗效率:能夠快速有效地去除紅細胞,縮短實(shi)驗周期(qi),提高實(shi)驗效率。
2.減少污染風(feng)險:由于對(dui)其他(ta)細胞類(lei)型(xing)的(de)影響較小,可以降(jiang)低實(shi)驗過(guo)程中的(de)污染風(feng)險。
3.適用范圍廣:適用于多種類型的血液樣本處(chu)理,如(ru)全(quan)血、骨(gu)髓等。
4.易于儲存和使(shi)用:通(tong)常以液(ye)體形式提供(gong),易于儲存和使(shi)用,無需(xu)特殊(shu)設備。