產品名稱(cheng)：大鼠腫瘤壞死因子(zi)α（TNF-α）試劑盒(he)

產品介(jie)紹：

本試(shi)劑(ji)盒用(yong)于體外定量檢(jian)測血清、血漿、組(zu)織勻漿及相關液(ye)體樣本中大鼠腫瘤壞(huai)死因子(zi)α（TNF-α）的含(han)量。

有(you)效(xiao)期：6個(ge)月(yue)

保存條件：2-8℃

本試劑盒僅供(gong)科研使用，不得用于臨(lin)床(chuang)診斷。

實驗(yan)原(yuan)理(li)：

試劑盒采(cai)用(yong)雙抗體(ti)(ti)一步夾心(xin)法酶(mei)聯免疫吸(xi)附試驗（ELISA）。往預先包被大(da)鼠腫瘤(liu)壞死(si)因子(zi)α（TNF-α）捕獲抗體(ti)(ti)的包被微(wei)孔(kong)中，依次加入(ru)標(biao)本、標(biao)準(zhun)品、HRP標(biao)記的檢測(ce)抗體(ti)(ti)，經過溫育并洗滌。用(yong)底物(wu)TMB顯色(se)(se)，TMB在過氧化(hua)物(wu)酶(mei)的催化(hua)下(xia)(xia)轉(zhuan)化(hua)成藍色(se)(se)，并在酸(suan)的作用(yong)下(xia)(xia)轉(zhuan)化(hua)成最終的黃色(se)(se)。顏色(se)(se)的深淺和(he)樣品中的大(da)鼠腫瘤(liu)壞死(si)因子(zi)α（TNF-α）呈正(zheng)相關。用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)在450nm 波長下(xia)(xia)測(ce)定(ding)吸(xi)光(guang)度（OD 值），計算樣品濃(nong)度。

樣本(ben)處理及要求：

1. 血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。
3. 組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

4. 細胞培養物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

注：標(biao)本(ben)溶血(xue)會影(ying)響最后(hou)檢測結果，因此溶血(xue)標(biao)本(ben)不宜進行此項檢測。